محیط کشت زایلوز لیزین Deoxycholate یا محیط کشت آگار یا گزیلوز – لیزین – دزوکسی کولات آگار و یا محیط کشت XLD آگار با نام انگلیسی Xylose Lysine Deoxycholate agar به عنوان یک محیط انتخابی و تمایزی برای جداسازی و ایزوله کردن پاتوژن های گرم منفی روده ای ( سالمونلا و شیگلا ) از نمونه های مدفوع و یا سایر نمونه ها استفاده می شود.
این محیط توسط تیلور به منظور افزایش بهره وری جداسازی و شناسایی گونه های پاتوژن به ویژه شیگلا می باشد به این صورت که پاتوژن ها نه تنها از تخمیر کننده های لاکتوز غیر پاتوژن بلکه از غیر پاتوژن هایی که لاکتوز و ساکاروز را تخمیر نمیکنند تفکیک می کنند. به علاوه این محیط ها طوری فرموله شده اند که باعث افزایش رشد گونه های شیگلا میشوند در صورتی که در محیط های دیگر به دلیل وجود مهار کننده های سمی این اتفاق نمی افتد.
این محیط دارای عصاره مخمر به عنوان منبع مواد مغذی و ویتامین ها است و سدیم دزوکسی کولات به عنوان معرف انتخابی است و باعث مهار میکروارگانیسم های گرم مثبت می شود. گزیلوز به داخل محیط متصل شده و توسط تمام گونه ها به جز شیگلا تخمیر می شود و همین باعث تمایز گونه های شیگلا می شود. لیزین به این محیط اضافه می شود تا گروه سالمونلا از غیر پاتوژن ها متمایز شود چون بدون لیزین سالمونلا به سرعت گزیلوز را تخمیر می کند و بدین ترتیب از گونه های غیر پاتوژن غیر قابل تشخیص می شود. برای افزودن توانایی تفکیک فرمول، یک سیستم معرف H۲S شامل تیوسولفات سدیم و سیترات آمونیم فریک به آن اضافه شده است تا با اثر گذاشتن در تشکیل کلنی هایی با مراکز سیاه سولفیدهیدروژن تولید شده قابل مشاهده گردد.
فرمولاسیون XLD Agar (گرم / لیتر):
Xylose ……………………………۳.۵ g
L-Lysine ………………………….۵.۰ g
Lactose …………………………..۷.۵ g
Sucrose………………………….. ۷.۵ g
Sodium Chloride………………. ۵.۰ g
Yeast Extract………………….. ۳.۰ g
Phenol Red …………………….۰.۰۸ g
Sodium Desoxycholate……… ۲.۵ g
Sodium Thiosulfate …………..۶.۸ g
Ferric Ammonium Citrate……۰.۸ g
Agar …………………………….۱۳.۵ g
ویژگی محیط کشت XLD آگار:
حاوی نشانگر فنل رد
وجود قند گزیلوز به عنوان منبع کربوهیدرات
تغییر رنگ محیط از قرمر به زرد در صورت وجود باکتری سالمونلا
تشکیل کلنی های قرمز رنگ درصورت وجود باکتری شیگلا
کاربرد محیط کشت XLD آگار:
جداسازی باکتری شیگلا از سالمونلا
در آزمایشگاه های بالینی و صنایع غدایی
محیط کشت ایکس ال دی آگار با نام انگلیسی XLD agar یک محیط کشت انتخابی افتراقی برای جداسازی میکروارگانیسم های گرم منفی روده ای در نمونه های موادغذایی و بالینی مورد استفاده قرار می گیرد. XLD آگار (سدیم دیوکسی کلات) موجود در محیط کشت به عنوان ماده انتخابی عمل کرده و از رشد میکروارگانیسم های گرم مثبت ممانعت می نماید. همچنین وجود سیترات آمونیوم آهن موجود در محیط اجازه می دهد تا در شرایط قلیایی کلنی هایی با مرکز سیاه تشکیل شده که خود عامل افتراق باکتری سالمونلا از شیگلا است.
روش ساخت محیط کشت XLD AGAR:
۵۵ گرم از محیط کشت ایکس ال دی اگار را در یک لیتر اب مقطر حل کرده سپس حرارت میدهیم تا کاملا محیط کشت محلول شود بلافاصله به حمام آب در دمای ۵۰ درجه سانتی گراد منتقل کنیدو در اخر در دمای مناسب قرار می دهیم تا سرد شود و داخل پلیت های استریل پخش می کنیم.
نکات مهم محیط کشت XLD AGAR:
تخریب گزیلوز ، لاکتوز و ساکارز باعث تولید محصولات اسیدی می شود و باعث تغییر رنگ محیط از قرمز به زرد می شود.
تولید سولفید هیدروژن در شرایط قلیایی باعث می شود که کلنی ها مراکز سیاه ایجاد کنند. این واکنش توسط شرایط اسیدی همراه با تخمیر کربوهیدرات مهار می شود.
دکربوکسیلاسیون لیزین در غیاب تخمیر لاکتوز و ساکاروز باعث برگشت به حالت قلیایی شده و رنگ محیط به قرمز تغییر می کند.
نگهداری محیط کشت XLD آگار:
XLD آگار صرفا برای آزمایشگاه است و باید درب قوطی کاملا بسته باشد.
از تابش شدید آفتاب جلوگیری شود.
در محیط خشک و خنک و رطوبت کمتر از ۶۰% قرار گیرد.
محیط آماده شده را در دمای ۱۵ تا ۲۵ درجه سانتی گراد نگهداری کنید.
محیط کشت XLD آگار برای جداسازی باکتری هایی چون انتو‌باکتریسه یا بیماری زا تمایز یافته خصوصا گونه های سالمونلا و شیگلا که در مواد غذایی یافت می‌شود و تهیه تمامی محیط های کشت پودری کافیست مقدار کمی از آن را با آب مقطر ترکیب کنید و حرارت دهید در نهایت به درجه جوشیدن برسد تا زمانی که به دمای تعیین شده برسد به آرامب خنک می‌شود تا قابل ریختن درون پلیت شود دارای پی اچ مشخص بین ۷ می‌باشد و به همین دلیل این محیط کشت در بسیاری از آژمایشگاه ها موجود می باشد در صورتی که شما قصد خرید محیط کشت محیط کشت ایس ال دی آگار با برند MERCK آلمان را دارید فروشگاه نرمال لابو این امکان را برای شما فراهم کرده است تا شما با اطینان خاطر از اصل بودن این محصول آن را خریداری نمایید در نظر داشته باشید که کارشناسان نرمال لابو آماده پاسخگویی به تمامی سوالات شما در رابطه با نحوه خرید این محیط کشت جامد و قیمت محیط کشت XLD آگار می باشند برای اطلاعات بیشتر با نرمال لابو در ارتباط باشید.
